EZ DNA Methylation DIRECT kit



Le kit EZ DNA Methylation-DIRECT Kit™ est le dernier-né des protocoles de Zymo concernant l'analyse de la méthylation: plus besoin de purifier vos ADN, vous réaliser l'analyse directement sur vos cellules !!

La sensibilité de ce kit permet de travailler avec un minimum de 10 cellules ou 50 pg d'ADN !!





Le kit permet de réduire la dégradation de la matrice et offre une conversion complète des Cytosines non méthylées. La matrice d'ADN ainsi traitée peut ensuite être utilisée pour une PCR sensible à la méthylation suivie d'une analyse de la méthylation par enzyme de restriction, séquençage, microarrays, etc.

Cette réaction peut être effectuée en 4 heures.

EZ DNA Methylation-Direct™ Kit bisulfite chemistry significantly improves C to U conversion kinetics. DNA was converted using either EZ DNA Methylation-Direct™ or conventional bisulfite chemistries. Recovered DNA was amplified by PCR, then cloned. Sequences from individual clones were analyzed and quantitated. These data show that EZ DNA Methylation-Direct™ bisulfite chemistry improves the rate and extent (> 99.8%) of C to U conversion of DNA as compared to conventional bisulfite chemistry. 

Caractéristiques:

• Matériel de départ:
  Cellules: Compatible avec des cellules de tissus solides, culture, sang , buffy coat,
  biopsies, échantillons LCM (Laser-Capture Micro-Dissection) et FFPE, etc. Le nombre de cellules par traitement est de 10 - 105 cellules. Pour des résulats optimaux, le nombre de cellules doit être compris entre 1 x 103 et 8 x 104 cellules.
  ADNs purifiés: échantillons contenant 50 pg - 2 μg d'ADN  avec des résultats optimaux dans la gamme 200-500 ng.
  • Efficacité de conversion: > 99.5%  de résidus C non méthylés sont convertis en U; > 99.5% protection des cytosines méthylées.
  • Quantité finale d'ADN: > 80%
  • Sensibilité de détection (Limite basse): 10 cellules pour une amplification par PCR.



Composition du kit:

• Proteinase K lyophilisée et tampon de stockage 5mg
• M-Digestion Buffer (2X) 4 ml
  
• 5 tubes de CT Conversion Reagent
  
• 1.5 ml M-Dilution Buffer,
  
• M-Solubilization Buffer 4.5 ml
• M-Reaction Buffer 1 ml
• 30 ml M-Binding Buffer
  
• 6ml M-Wash Buffer
  
• 10 ml M-Desulphonation Buffer
  
• 1.0 ml M-Elution Buffer
  
• 50 colonnes Zymo-Spin IC
  
• 50 tubes de collecte



Related PubMed Citations

DNMT3L Modulates Significant and Distinct Flanking Sequence Preference for DNA Methylation by DNMT3A...
Wienholz BL, Kareta MS, Moarefi AH, Gordon CA, Ginno PA, Chédin F | Published: 2010 Sep

Genome-Wide DNA Methylation Analysis Reveals Phytoestrogen Modification of Promoter Methylation...
Sato N, Yamakawa N, Masuda M, Sudo K, Hatada I, Muramatsu M | Published: 2011

Maternal Genome-Wide DNA Methylation Patterns and Congenital Heart Defects...
Chowdhury S, Erickson SW, MacLeod SL, Cleves MA, Hu P, Karim MA, Hobbs CA | Published: 2011


• Data Sheet (Size: 775.2 KB)
• Protocol (Size: 264.6 KB)
• MSDS (Size: 274.6 KB)